آزمایش برای بررسی جایگزینی گلیسرول با اریترتیول بر انجماد اسپرم قوچ انجام شد. نمونه منی از چهار قوچ در شش نوبت اخذ شد. در هر نوبت انزال ها تجمیع و بعد به 12 بخش تقسیم شد. به هر بخش مقدار 0. 032 مول گلیسرول (G32E0، برابر با 3 % گلیسرول)، 0. 016 مول گلیسرول و 0. 016 مول اریتریتول (G16E16)، 0. 008 مول گلیسرول و 0. 024 مول اریتریتول (G8E24)، 0. 032 مول اریتریتول (G0E32)، 0. 054 مول گلیسرول (G54E0، برابر با 5 % گلیسرول)، 0. 027 مول گلیسرول و 0. 027 مول اریتریتول (G27E27)، 0. 027 مول گلیسرول و 0. 041 مول اریتریتول (G13E41)، 0. 054 مول اریتریتول (G0E54)، 0. 076 مول گلیسرول (G76E0، برابر با 7 % گلیسرول)، 0. 038 مول گلیسرول و 0. 038 مول اریتریتول (G38E38)، 0. 019 مول گلیسرول و 0. 057 مول اریتریتول (G19E57) و 0. 076 مول اریتریتول (G0E76) اضافه شد. نمونه های رقیق شده با روش استاندارد منجمد شدند. بعد از یخ گشایی نمونه به مدت شش ساعت در ℃ 37 نگهداری شدند. نتایج نشان داد که پس از شش ساعت، حرکت پیش رونده اسپرم و سلامت اکروزوم در تیمارهایی که فقط حاوی گلیسرول بودند، کمتر از G13E41 (به ترتیب %18. 85 و %27. 41 ) بود (0. 05 > p). در سطح 0. 032 و 0. 054 مول سرما محافظ، بیشترین تحرک اسپرم پس از شش ساعت به ترتیب در G8E24 (%19. 16) و G19E41 %18. 85) مشاهد شد (0. 05 > p ). بنابراین کیفیت اسپرم منجمد قوج را می توان با استفاده از 0. 013 مول گلیسرول بعلاوه 0. 041 مول اریتریتول یا 0. 008 مول گلیسرول بعلاوه 0. 024 مول اریتریتول بهبود داد. . .

انجماد اسپرم اپیدیدیمی اهمیت فراوانی در برنامه های حفاظت از گونه های اهلی و وحشی در معرض خطر و نیز دام های نر پر ارزش در معرض حذف دارد. در مطالعه حاضر با هدف دست یابی به یک روش بهینه ی انجماد و ذوب اسپرم اپیدیدیمی گوسفند، اسپرم های استخراج شده از ناحیه دم اپیدیدیم بیضه ی قوچ های کشتار شده در رقیق کننده ی حاوی غلظت های 2، 4 و 6 درصد گلیسرول منجمد شده و در دماهای 37 و 65 درجه سانتی گراد ذوب شدند. پس از ذوب، شاخص های حرکتی اسپرم ها با دستگاه CASA سنجیده شد. داده ها با مدل آماری factorial ANOVA به منظور یافتن اختلاف آماری بین اثرات اصلی غلظت گلیسرول و دمای ذوب و همچنین میان کنش بین اثرات اصلی (غلظت گلیسرول×دمای ذوب) تحلیل آماری شدند و به دلیل نبود یک میان کنش معنی دار، اثرات اصلی تفسیر شدند. تاثیر غلظت گلیسرول بر همه ی شاخص های حرکتی و تاثیر دمای ذوب بر اکثر این شاخص ها معنی دار بود (05/0>P). در بین غلظت های مختلف گلیسرول، کمترین تحرک مربوط به غلظت 2 درصد و بیشترین تحرک مربوط به غلظت 4 درصد بود (05/0>P). بین دو دمای مختلف ذوب، دمای 65 درجه ی سانتی گراد نسبت به دمای 37 درجه ی سانتی گراد بهبود معنی داری در اغلب شاخص های اندازه گیری شده ایجاد کرده بود (05/0>P). انجماد اسپرم ها در رقیق کننده ی حاوی 4 درصد گلیسرول و ذوب اسپرم های منجمد شده در دمای 65 درجه ی سانتی گراد بهترین نتیجه را به دنبال داشت.

هدف: تعیین غلظتهای بهینه گلیسرول و زرده تخم مرغ به منظور انجماد مایع منی قوچمواد و روشها: جمع آوری مایع منی توسط واژن مصنوعی انجام شد. از هر قوچ دو انزال پی در پی به صورت یک روز در میان جمع آوری شد. نمونه ها با محیطهای انجماد فوق به روش یک مرحله ای رقیق شدند و تا دمای 5 درجه سانتیگراد به مدت 2 ساعت به صورت تدریجی سرد شدند، سپس به داخل نی های انجماد 0.5ml کشیده شدند. نی ها به مدت 12 دقیقه در بخار نیتروژن قرار داده شدند و برای ذخیره نهایی در نیتروژن مایع نگهداری شدند.یافته ها: نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که هر چند در تمام گروه های تیماری، اسپرمهای قوچ پس از انجماد - ذوب دارای تحرک بودند ولی درصد تحرک در گروه های مختلف تیماری با یکدیگر متفاوت است.نتیجه گیری: نتایج حاصل از این تحقیق بیانگر این است که هر چند درصد تحرک اسپرم پس از انجماد - ذوب در تمام گروه های تیماری در مقایسه با حالت قبل از انجماد کاهش معنی داری (p£0.05) را نشان می دهد ولی در بین گروه های تیماری، گروه E10G4 (10 درصد زرده تخم مرغ و 4 درصد گلیسرول)، کمترین (3.4 درصد) و گروه E20G8 (20 درصد زرده تخم مرغ و 8 درصد گلیسرول)، بیشترین (48 درصد) درصد تحرک اسپرم را پس از انجماد ذوب نشان دادند.

این مطالعه به منظور بررسی اثر حفاظتی ذرات نانو هیدروکسی آپاتیت بر اسپرم طی انجماد با استفاده از پنج راس قوچ انجام شد. انزال ها (30=n) به صورت سه روز یک بار در شش نوبت جمع آوری شد. در هر نوبت، انزال ها تجمیع و به 12 قسمت مساوی تقسیم شدند. مقدار 01/0، 02/0، 05/0 یا 1/0 درصد هیدروکسی آپاتیت و 3، 5 یا 7 درصد گلیسرول به هر بخش اضافه شد. نمونه ها منجمد شده و برای دو هفته ذخیره شدند. سپس تعداد دو پایوت از هر تکرار (جمعاً 144 پایوت)، یخ گشایی شد و به مدت شش ساعت در 37 درجه سلسیوس نگهداری شدند. میزان تحرک، زنده مانی، سلامت غشای اسپرم و سلامت آکروزوم طی ساعات صفر، 3 و 6 پس از یخ گشایی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که اثر متقابل ذرات نانو هیدروکسی آپاتیت، گلیسرول و زمان بر فراسنجه های اندازه گیری شده معنی دار نبود (05/0P). سلامت غشا در سطح 02/0 ذرات نانو هیدروکسی آپاتیت (7/52%) بیشتر از سایر سطوح بود (05/0>P). بنابراین افزودن 02/0 درصد ذرات نانو هیدروکسی آپاتیت به رقیق کننده منی قوچ سبب بهبود کیفیت اسپرم در روند انجماد می شود.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (PDF) مراجعه فرمایید.

داشتن یک رقیق ­کننده مناسب که بتواند از اسپرم در برابر آسیب انجماد و یخ­گشایی محافظت کند، ضروری است. در این راستا، این مطالعه به منظور بررسی تأثیر جایگزینی شیره نارگیل با زرده تخم مرغ در رقیق کننده بر فراسنجه های کیفی اسپرم قوچ انجام شد. نمونه های منی از پنج رأس قوچ لری- بختیاری دو بار در هفته با استفاده از واژن مصنوعی جمع آوری شدند. منی ترکیبی از پنج قوچ، تحت شش تیمار شامل سطوح مختلف شیره نارگیل (5، 10، 15، 20 و 25 درصد) و یک تیمار با زرده تخم مرغ (15 درصد) قرار گرفت. قبل و بعد از انجماد، فراسنجه های سرعتی اسپرم، یکپارچگی و فعالیت غشاء، مورفولوژی، نرخ پراکسیداسیون لیپیدی و قطعه قطعه شدن DNA اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفت. در پایان، داده ها با نرم افزار آماری SAS تجزیه و تحلیل شدند. نتایج قبل از انجماد نشان داد که به جز فراسنجه BCF، هیچ تفاوتی در سایر فراسنجه های جنبایی اسپرم، زنده مانی، فعالیت غشای پلاسمایی اسپرم و مورفولوژی اسپرم وجود ندارد (05/0P≥). با این حال، کاهش قابل توجهی در فراسنجه های جنبایی اسپرم پس از یخ­گشایی در همه تیمارها مشاهده شد. این اثر مخرب پس از انجماد در رقیق­کننده مکمل شده با شیره نارگیل نسبت به رقیق­کننده حاوی زرده تخم مرغ بیشتر بود. به طوری که تیمار زرده تخم مرغ به جز در VCL (41/10±36/94 µm/s) وBCF  (70/0±83/5 هرتز)، در سایر فراسنجه های جنبایی، به طور معنی­داری بیشتر از تیمارهای مکمل شده با شیره نارگیل بود. مورفولوژی اسپرم، غلظت MDA و نرخ قطعه قطعه شدن DNA نیز تحت تأثیر تیمارها قرار نگرفتند. نتایج این مطالعه نشان داد که افزودن شیره نارگیل به رقیق­کننده اسپرم، جایگزین مناسبی برای زرده تخم مرغ برای انجماد اسپرم قوچ نیست.

هدف از این مطالعه بررسی اثر عصاره پوست بادمجان بر کیفیت اسپرم قوچ پس از ذوب در رقیق کننده بر پایه تریس بود.  مایع منی توسط واژن مصنوعی جمع آوری شد.  نمونه ها برای جلوگیری از اثرات فردی باهم مخلوط شدند.  سپس نمونه های مایع منی قوچ با بر پایه تریس رقیق شد و با عصاره پوست بادمجان 0، 2، 4، 6 و 8 درصد تکمیل شد.  سپس نمونه ها توسط نیتروژن مایع در پایوت (25/0 میلی لیتر) منجمد شدند.  پس از ذوب، تحرک اسپرم، زنده ماندن (رنگ آمیزی نیگروزین-ائوزین)، یکپارچگی غشاء با محلول هیپواسموتیک (Host) و ناهنجاری مورفولوژی (تست هانکوک) مورد بررسی قرار گرفت.  نتایج نشان داد که مقدار 2 درصد (4/62) پوست عصاره بادمجان تأثیر معنی داری بر تحرک اسپرم و یکپارچگی غشاء پس از ذوب داشت.  همچنین گروه­های 2 و 4 درصد عصاره پوست بادمجان دارای بیشترین تحرک نسبت به گروه کنترل و کمترین تحرک در غلظت 8 درصد عصاره پوست بادمجان در مقایسه با گروه شاهد بود.  بنابراین، افزودن 2 و 4 درصد عصاره پوست بادمجان به رقیق کننده بر پایه تریس سبب حفظ اسپرم قوچ فراهانی پس از ذوب شد.

زمینه مطالعاتی: طی مراحل انجماد و یخ گشایی اسپرم، استرس اکسیداتیو باعث کاهش تحرک، زنده مانی، یکپارچگی غشاء، ظرفیت آنتی اکسیدانی و در نهایت میزان باروری اسپرم می شود. گیاه شاه اسپرم به دلیل داشتن ترکیبات فنولیک دارای خاصیت آنتی اکسیدانی می باشد. هدف: در این مطالعه تأثیر عصاره گیاه شاه اسپرم به عنوان یک آنتی اکسیدان طبیعی بر کیفیت اسپرم منجمد-یخ گشایی شده قوچ مغانی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: برای این منظور در فصل تولیدمثلی از چهار رأس قوچ مغانی 4-3 ساله با میانگین وزنی 70 کیلوگرم، هفته ای دو بار اسپرم گیری شد. سپس نمونه ها با رقیق کننده بر پایه زرده تخم مرغ-سیترات حاوی سطوح مختلف عصاره گیاه شاه اسپرم (0، 2، 4، 8، 12 و 16 میلی لیتر در دسی لیتر محلول رقیق کننده) رقیق شدند. نمونه ها پس از طی مراحل سردسازی تا دمای 4 درجه سانتی گراد، به مدت 8 دقیقه روی بخار ازت منجمد شده و تا زمان ارزیابی در داخل ازت مایع نگهداری شدند. پس از یخ گشایی، فراسنجه های حرکتی اسپرم به وسیله سیستم کاسا، زنده مانی به روش رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین، تست یکپارچگی غشاء با محلول هایپواسموتیک و تعیین اسپر م های ناهنجار با محلول هانکوک مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: غلظت های 8 و 12میلی لیتر در دسی لیتر عصاره گیاه شاه اسپرم، به طور معنی داری تحرک کلی و تحرک پیش رونده اسپرم را نسبت به گروه شاهد بهبود داد (05/0p <). درصد فراسنجه های VSL، VCL و VAP در تیمارهای 8 و 12 میلی لیتر نسبت به تیمارهای شاهد و 16 میلی لیتر بالاتر بود (05/0p <). درصد فراسنجه LIN در تیمار 8 میلی-لیتر نسبت به 16 میلی لیتر بالاتر بود. بالاترین درصد زنده مانی اسپرم مربوط به تیمار 12 میلی لیتر و بالاترین درصد یکپارچگی غشای پلاسمایی اسپرم مربوط به تیمار 8 و 12 میلی لیتر بود (05/0p <). درصد اسپرم ناهنجار در تیمار 12 میلی لیتر نسبت به تیمارهای شاهد و 2 میلی لیتر کمتر بود (05/0p <). نتیجه گیری نهایی: به طور کلی استفاده از 12 میلی لیتر در دسی لیتر عصاره گیاه شاه اسپرم در رقیق کننده منی سبب بهبود کیفیت اسپرم منجمد-یخ گشایی شده قوچ شد.

هدف از اجرای این طرح بهبود بازده باروری اسپرم در گوسفند با افزودن آنتی اکسیدان سیستیامین به محیط انجماد بوده است. در این آزمایش اسپرم از 5 رأس قوچ نژاد زندی جمع آوری به رقیق کننده های حاوی صفر، 1، 2، 4 و 8 میلی مولار سیستیامین اضافه و سپس منجمد شدند. در مرحله ارزیابی آزمایشگاهی کیفیت اسپرم، اسپرم های منجمد مورد ارزیابی آزمایشگاهی قرار گرفتند و فراسنجه های حرکتی، زنده مانی، سلامت غشا، مورفولوژی، سلامت آکروزوم، فعالیت میتوکندری و میزان لیپید پراکسیداسیون مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که استفاده از 2 میلی مولار سیستیامین منجر به بهبود جنبایی کل، جنبایی پیشرونده، سلامت غشا، فعالیت میتوکندری، سلامت آکروزوم، زنده مانی و کاهش آپوپتوزیس و پراکسیداسیون لیپیدهای غشایی در اسپرم منجمد قوچ پس از یخگشایی شد. استفاده از تیمار 8 میلی مولار سیستیامین منجر به کاهش کیفیت اسپرم پس از یخگشایی شد و استفاده از آنتی اکسیدان سیستیامین تاثیری بر مورفولوژی اسپرم پس از فرایند انجماد-یخگشایی نداشت. در نتیجه استفاده از تیمار 2 میلی مولار آنتی اکسیدان سیستیامین می تواند راهکاری مناسب برای بهبود بازده اسپرم قوچ پس از فرایند انجماد-یخگشایی باشد.